Figlia di Fabrizio e di Agnese di Montefeltro. Sposò Ferrante d’Avalos marchese di Pescara, in un matrimonio che doveva unire i Colonna con gli Aragonesi. Frequentò l’ambiente culturale napoletano e conobbe Juan de Valdès, tramite il quale venne a contatto con il pensiero religioso eterodosso. Gli scambi intellettuali con alcune importanti figure della cultura riformata, quali Bernardino Ochino, Pietro Carnesecchi e Reginald Pole, la avvicinarono sempre di più a posizioni di criptoprotestantesimo, che si riflettono nelle sue Rime spirituali (Venezia 1546). Ammalatasi, si ritirò definivamente nel convento di Sant’Anna a Roma. Ebbe scambi epistolari con Baldassar Castiglione, Marco Antonio Flaminio e, soprattutto, visse un intenso sodalizio con Michelangelo.